檢測抗體設備購置的注意事項
抗體是完成免疫組織化學染色的主要試劑,可將其分為特異性一抗(或稱一級抗體)和第二抗體(或稱二級抗體,也可稱為二抗或標記二抗),尤其特異性一抗更為重要。目前國內外市場各種特異性抗體日益增多,銷售公司也很多,大多數使用者直接選用市售現成商品。www.rose-nail.cn
抗體質量的好壞是完成免疫組化工作的關鍵,目前可從二條途徑獲得。首先可從市場上獲得商品化抗體,這是主要來源。但有時為了研究或證實一種新的抗原成分,而又無相應抗體可購買時,往往需要自己制備抗血清。當然,也可以從文獻上查找,并向作者索要。
原則上應選擇在較高稀釋度時染色較佳、背景較低、結果穩定、重復性好的商品化抗體。目前供IHC研究和診斷用的抗體種類繁多,制造商如林,不同廠家的相同抗體,其價格、包裝及抗體的*工作濃度差異較大。在選購時,應多聽取有實踐經驗專家的意見。另外,還應考慮抗體的種屬。
一般用于診斷、鑒別診斷的抗體zui常見的是兔和小鼠的單克隆抗體,并注明可用于診斷,其價格也較昂貴;而用于研究用的抗體,其種屬較多,例如兔、小鼠、羊、大鼠和雞的抗體等,其價格相對廉價,品種較新。購買抗體前要了解清楚是否與實驗室現有的檢測試劑配套和能用于何種切片類型檢測,例如冰凍切片或石蠟切片,一般需購置能用于石蠟切片檢測的。
此外,還應了解清楚是否需要何種前處理(酶消化或抗原修復),以及抗體的*稀釋度等問題。購置能用于石蠟切片,稀釋度在1:100以上的抗體。
在購置用于實驗研究檢測的抗體時,應認真閱讀其產品的說明介紹。因實驗研究用的抗體種類特別繁多,而且很新,檢測的對象往往是各種動物標本,如狗、兔、猴、大鼠、小鼠、豬等。
各廠家生產的抗體,尤其是基因抗體,往往是針對人、或某種動物的,或各種動物有交叉,但有一部分抗體只針對人或鼠,對其他動物無交叉反應,如需檢測犬類或兔組織標本中的某些抗原時,就無法檢測到。因此,在選擇此類抗體時,一定注意掌握其背景資料。
另外,購置抗體后,一定請公司告知其生產日期、商品號(cat,lot)、檢測范圍和用何種前處理方式等。www.elisa17.com